熒光色素:四甲基異硫氰酸羅丹明(tetramethylrhodamineisothiocyanate,TRITC),其結(jié)構(gòu)式如下所示,比較大吸收光波長為 550nm,比較大發(fā)射光波長為 620nm,呈現(xiàn)出橙紅色熒光。和 FITC 的翠綠色熒光形成鮮明對比,能夠配合用于雙重標(biāo)記或者對比染色。它的異硫氰基能夠和蛋白質(zhì)相結(jié)合,不過熒光效率比較低。免疫熒光技術(shù)也被稱作熒光抗體技術(shù),屬于標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展相對較早的一種。很早的時候就有一些學(xué)者嘗試把抗體分子與某些示蹤物質(zhì)進(jìn)行結(jié)合,借助抗原抗體反應(yīng)來對組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原物質(zhì)進(jìn)行定位,而該技術(shù)就是在此基礎(chǔ)上建立起來的一項(xiàng)技術(shù)。我們的免疫熒光試劑適用于活細(xì)胞成像。CK7即用免疫檢測
**微環(huán)境是一個復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng),包含腫瘤細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等多種成分,以及細(xì)胞因子、趨化因子等多種生物分子。利用多重免疫熒光和多色免疫熒光技術(shù),我們可以對**微環(huán)境中的多種成分進(jìn)行標(biāo)記。例如,用綠色熒光標(biāo)記腫瘤細(xì)胞,紅色熒光標(biāo)記**相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAMs),藍(lán)色熒光標(biāo)記**血管內(nèi)皮細(xì)胞。這樣,在**組織切片上就可以直觀地看到腫瘤細(xì)胞與周圍免疫細(xì)胞和血管的空間關(guān)系。同時,我們還可以標(biāo)記與腫瘤免疫逃逸相關(guān)的分子。比如,用黃色熒光標(biāo)記腫瘤細(xì)胞表面的程序性死亡配體-1(PD-L1),紫色熒光標(biāo)記浸潤在**組織中的T細(xì)胞表面的程序性死亡受體-1(PD-1)。通過觀察這些標(biāo)記分子的表達(dá)情況以及它們之間的相互作用,能夠深入了解腫瘤細(xì)胞是如何通過與免疫細(xì)胞的相互作用來逃避免疫監(jiān)視的。這對于開發(fā)基于**微環(huán)境的免疫治療方法,如免疫檢查點(diǎn)抑制劑的應(yīng)用,具有重要的指導(dǎo)意義。CK7即用免疫檢測免疫熒光染色服務(wù)提供多種圖像銳化選項(xiàng)。
在腫瘤免疫***中,如免疫檢查點(diǎn)抑制劑***。我們可以用不同顏色的熒光標(biāo)記腫瘤細(xì)胞表面的免疫檢查點(diǎn)分子,如程序性死亡受體-1(PD-1)及其配體(PD-L1),同時用其他顏色標(biāo)記**微環(huán)境中的免疫細(xì)胞,如T細(xì)胞、NK細(xì)胞等。在***前,通過觀察這些標(biāo)記分子和細(xì)胞的初始狀態(tài),可以了解**微環(huán)境的免疫抑制情況。在***過程中及***后,再次進(jìn)行多色免疫熒光檢測,對比前后的變化。如果看到PD-L1在腫瘤細(xì)胞上的表達(dá)降低,T細(xì)胞和NK細(xì)胞在**組織中的浸潤增加且活性增強(qiáng),這表明免疫檢查點(diǎn)抑制劑可能正在發(fā)揮作用,改善了**微環(huán)境的免疫狀態(tài),提高了機(jī)體對**的免疫應(yīng)答能力。在自身免疫性疾病的免疫調(diào)節(jié)***中,多重免疫熒光也能發(fā)揮作用。例如,在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的***評估中,用不同顏色標(biāo)記關(guān)節(jié)滑膜組織中的炎癥細(xì)胞、自身抗體以及與關(guān)節(jié)修復(fù)相關(guān)的分子。通過觀察這些標(biāo)記成分在***前后的變化,如炎癥細(xì)胞數(shù)量的減少、自身抗體結(jié)合的減弱以及關(guān)節(jié)修復(fù)分子的增加,可以判斷免疫調(diào)節(jié)***是否有效,從而為調(diào)整***方案提供依據(jù)。
免疫熒光在眼科疾病研究中具有重要的意義,為眼科疾病的診斷和研究提供了有力支持。在視網(wǎng)膜疾病的研究中,例如年齡相關(guān)性黃斑變性(AMD),免疫熒光可用于標(biāo)記視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞和光感受器細(xì)胞中的特定蛋白。通過觀察這些蛋白在AMD患者視網(wǎng)膜中的變化,如某些蛋白的缺失或異常表達(dá),可以深入了解AMD的發(fā)病機(jī)制。同時,免疫熒光還可以檢測視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)情況,這對于研究AMD的血管新生機(jī)制以及評估抗VEGF***的效果具有重要價值。在青光眼的研究中,免疫熒光可以標(biāo)記視神經(jīng)**處的神經(jīng)纖維和細(xì)胞外基質(zhì)成分。通過觀察這些標(biāo)記物在青光眼患者中的變化,如神經(jīng)纖維的損傷和細(xì)胞外基質(zhì)的重塑,可以了解青光眼的視神經(jīng)損傷機(jī)制,為青光眼的早期診斷和***提供依據(jù)。免疫熒光染色服務(wù)提供多種圖像格式輸出。
免疫組化在消化系統(tǒng)疾病的研究和診斷中猶如一把神秘的鑰匙,能夠解開許多疾病之謎。消化系統(tǒng)包含多個***,如胃、腸、肝臟和胰腺等,每個***都可能發(fā)生各種各樣的病變。在胃*的診斷中,免疫組化可以檢測胃*細(xì)胞中的多種標(biāo)志物,如*胚抗原(CEA)、細(xì)胞角蛋白(CK)等。這些標(biāo)志物不僅有助于確定**的性質(zhì),還能判斷胃*的分化程度。例如,高分化的胃*細(xì)胞可能表達(dá)特定類型的細(xì)胞角蛋白,而低分化的胃*細(xì)胞其標(biāo)志物表達(dá)可能有所不同。此外,免疫組化還能檢測胃*細(xì)胞是否存在微衛(wèi)星不穩(wěn)定(MSI),這對于判斷患者是否適合免疫***具有重要意義。在肝臟疾病方面,免疫組化可用于檢測肝炎病毒相關(guān)抗原在肝臟組織中的分布,了解病毒***對肝臟細(xì)胞的影響。同時,在肝臟**的診斷中,免疫組化可以區(qū)分肝細(xì)胞*和膽管細(xì)胞*等不同類型的**,為制定個性化的***方案提供依據(jù)。免疫熒光染色技術(shù)可用于共定位研究。CD31免疫熒光
免疫熒光染色技術(shù)可用于亞細(xì)胞定位研究。CK7即用免疫檢測
免疫熒光在揭示細(xì)胞信號網(wǎng)絡(luò)方面發(fā)揮著重要作用,它能夠?qū)?fù)雜的信號傳導(dǎo)過程可視化。在細(xì)胞生長因子信號通路的研究中,生長因子與細(xì)胞表面受體結(jié)合后會啟動一系列的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)事件。通過免疫熒光標(biāo)記信號通路中的關(guān)鍵分子,如受體酪氨酸激酶及其下游的信號分子,如絲裂原活化蛋白激酶(MAPK),可以觀察到這些分子在細(xì)胞受到生長因子刺激時的磷酸化狀態(tài)和空間分布變化。這有助于構(gòu)建完整的細(xì)胞生長因子信號網(wǎng)絡(luò),理解不同信號分子之間的相互作用和調(diào)控關(guān)系。在細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)信號通路的研究中,例如細(xì)胞在缺氧狀態(tài)下的信號傳導(dǎo)。免疫熒光可以標(biāo)記缺氧誘導(dǎo)因子(HIF-1α)等關(guān)鍵分子,觀察它們在細(xì)胞內(nèi)的定位和表達(dá)變化。這對于研究細(xì)胞如何適應(yīng)缺氧環(huán)境以及在疾病狀態(tài)下(如**缺氧微環(huán)境)這些信號通路的異常具有重要意義。CK7即用免疫檢測