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糖原及粘液染色法注意事項(xiàng)：1、糖原的固定要及時(shí)，而且標(biāo)本要新鮮。2、如用無(wú)水酒精作糖原的固定劑，有它的弊病，因無(wú)水酒精滲透較慢，而且容易產(chǎn)生極化，（極化是糖原顆粒趨向于細(xì)胞的一端）。故用Gendre氏固定液效果較佳，其配法如下：苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各種試劑必須化學(xué)純，亞硫酸鈉須有濃厚氣味，器皿必須潔凈而干燥，染色缸亦是。4、如果Schiff氏試劑，在經(jīng)過(guò)活性碳吸附漂白后不顯無(wú)色，首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃，使用時(shí)可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧?。其次考慮堿性品紅本身，常常雖屬同一生產(chǎn)廠家，但不同批號(hào)，其效果就可能不同，應(yīng)特別引起注意~糖原染色試劑盒是什么？哪家提供糖原染色試劑盒量大從優(yōu)

糖原染色法：染色原理細(xì)胞胞漿中存在糖原或多糖類(lèi)物質(zhì)（如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等），過(guò)碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化為二醛基，其與Schiff試劑中的無(wú)色品紅結(jié)合后呈現(xiàn)紫紅色，沉積在細(xì)胞內(nèi)多糖所在之處。染色步驟：1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水，蒸餾水洗2min（細(xì)胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗）；2.滴加過(guò)碘酸溶液，氧化5min；3.蒸餾水洗10min；4.滴加Schiff試劑，侵染10-20min；5.傾去Schiff試劑，流水沖洗10min；6.滴加蘇木素染色液，染核1-2min；7.流水沖洗5min；8.酸性乙醇分化液分化~上海咨詢糖原染色試劑盒產(chǎn)品介紹擁有千錘百煉的專(zhuān)業(yè)人才隊(duì)伍，保證實(shí)驗(yàn)快速、有效的完成。

糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過(guò)碘酸氧化，產(chǎn)生醛基，與雪夫（Schiff）試劑中無(wú)色品紅結(jié)合，形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng)。（1）雪夫液配制：堿性品紅1g溶于200ml沸水中，冷卻60℃時(shí)過(guò)濾，加1mmol/L鹽酸20ml，再冷卻至25℃左右，加偏重亞硫酸鈉（Na2S2O5）2g，混合后放棕色瓶中，置暗處24h，無(wú)色即可放冰箱中保存，呈微紅色，則加活性炭1～2g，吸附過(guò)濾使成無(wú)色液體，放冰箱中保存。若溶液變紅，即不能再用。（2）10g/L過(guò)碘酸水溶液：過(guò)碘酸（HIO4·2H2O）1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用，一般可用3個(gè)月，變黃則失效

糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一，McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白，該法常用來(lái)顯示糖原和其他多糖，該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過(guò)碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑，它能氧化糖類(lèi)及有關(guān)物質(zhì)中的1，2-乙二醇基，使之變?yōu)槎?，醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物，產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)，使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間，使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過(guò)氧化，這是很關(guān)鍵的步驟。PAS技術(shù)是很少可檢測(cè)不同種類(lèi)的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法，但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原)，需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來(lái)催化糖原的糖苷鍵水解，形成水溶性的雙糖-麥芽糖，在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類(lèi)的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段，但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮，不主張應(yīng)用唾液在滴加染液時(shí)，務(wù)必使染液完全覆蓋組織，但不能溢出圈外，避免浪費(fèi)試劑。

染色的一般原則：因檢測(cè)細(xì)胞的類(lèi)型、凋亡誘導(dǎo)劑種類(lèi)、使用的檢測(cè)儀器不同，因而流式檢測(cè)的熒光補(bǔ)償也不同，因此建議每次檢測(cè)均需使用凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞做單陽(yáng)對(duì)照，進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。標(biāo)記抗體常用熒光素FITC，EGFP激發(fā)光：488nm發(fā)射光：525nm;使用面較廣，價(jià)格便宜。PE激發(fā)光488nm發(fā)射光575nm，此熒光的激發(fā)效率較佳，故此熒光得到的信號(hào)較強(qiáng)；檢測(cè)某些弱表達(dá)的抗原，推薦使用此熒光素。價(jià)格較FITC昂貴。APC激發(fā)光633nm，發(fā)射光660nm，在配有雙激光的流式細(xì)胞儀上，此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來(lái)避開(kāi)自帶綠色熒光的樣本。流式細(xì)胞儀相關(guān)試劑盒。糖原染色顯示在肝或心肌細(xì)胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診。浙江口碑好的糖原染色試劑盒平均價(jià)格

無(wú)水酒精滲透較慢，而且容易產(chǎn)生極化。哪家提供糖原染色試劑盒量大從優(yōu)

糖原染色在使用過(guò)程中需要注意以下幾個(gè)方面：盡可能選取小塊新鮮組織及時(shí)固定。糖原易溶于水，在酶的作用下很容易分解葡萄糖，更易溶于水，固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗。應(yīng)避免用水溶性固定液，宜采用酒精性固定液，如Carnoy液，能較好地保存糖原，但有使糖原流動(dòng)到細(xì)胞一側(cè)的現(xiàn)象，多數(shù)人認(rèn)為是由于固定劑把細(xì)胞內(nèi)的糖原推向固定劑對(duì)組織浸透的方向而造成。其他組織應(yīng)用中性福爾馬林固定為佳。組織在4℃左右溫度內(nèi)固定與保存，是針對(duì)糖的性質(zhì)和避免糖原溶于水而采取的相應(yīng)措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白，亦能白和糖原沉淀，但仍可溶于水，因此較好不單獨(dú)使用乙醇固定，以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳哪家提供糖原染色試劑盒量大從優(yōu)