分光光度計(jì)的故障診斷與排除需遵循“先外觀后內(nèi)部、先軟件后硬件”的原則,確定問題并讓儀器正常運(yùn)行。常見故障之一是吸光度讀數(shù)不穩(wěn)定,可能原因包括:光源不穩(wěn)定(如鎢燈老化、氘燈電流波動(dòng)),需檢查光源指示燈是否閃爍,若閃爍需更換光源或檢查電源穩(wěn)定性;比色皿污染或未放正,需用擦鏡紙擦拭比色皿透光面,確保比色皿放置時(shí)透光面與光路對(duì)齊;檢測(cè)器受潮或污染,需打開儀器樣品室,用干燥的氮?dú)獯祾邫z測(cè)器窗口,避免灰塵或水汽影響檢測(cè)。另一常見故障是無吸光度讀數(shù),需先檢查軟件設(shè)置(如是否處于“吸光度”測(cè)量模式,而非“透光率”模式),再檢查光路是否被遮擋(如樣品室門未關(guān)嚴(yán),儀器自動(dòng)切斷光路保護(hù)檢測(cè)器),若光路正常則可能是檢測(cè)器故障(如光電倍增管損壞),需聯(lián)系維修人員更換?;€漂移過大的故障排查,需先檢查環(huán)境條件(如溫度是否在15-30℃,濕度是否≤75%),若環(huán)境穩(wěn)定則可能是單色器污染,需在無塵環(huán)境下拆開單色器外殼,用干凈的脫脂棉蘸取少量乙醇輕輕擦拭光柵表面(避免劃傷),隨后重新校準(zhǔn)波長(zhǎng)。在故障排除過程中,需避免自行拆解儀器重要部件(如光源室、檢測(cè)器模塊),同時(shí)記錄故障現(xiàn)象、排查步驟與解決方案,建立故障處理檔案。 分光光度計(jì)的光源穩(wěn)定性直接關(guān)系到檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。北京單光束分光光度計(jì)使用壽命

分光光度計(jì)在實(shí)驗(yàn)中的酶活性測(cè)定中有較多的應(yīng)用,以過氧化氫酶活性測(cè)定為例,過氧化氫酶可催化過氧化氫分解為水和氧氣,在反應(yīng)過程中,過氧化氫的濃度會(huì)逐漸降低,其吸光度也會(huì)隨之下降。分光光度計(jì)可在240nm波長(zhǎng)處實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)過氧化氫溶液吸光度的變化,根據(jù)吸光度的下降速率計(jì)算過氧化氫酶的活性。通常以每分鐘內(nèi)吸光度下降為一個(gè)酶活性單位(U),酶活性(U/mL)=(ΔA×V總)/(ε×b×V樣×t),其中ΔA為反應(yīng)時(shí)間t內(nèi)的吸光度變化值,V總為反應(yīng)體系總體積(mL),ε為過氧化氫在240nm波長(zhǎng)處的摩爾吸光系數(shù)(?mol?1?cm?1),b為比色皿光程(cm),V樣為加入的酶液體積(mL),t為反應(yīng)時(shí)間(min)。在實(shí)驗(yàn)過程中,需嚴(yán)格把控反應(yīng)溫度在25℃±℃,溫度對(duì)酶的活性影響較大,溫度過高會(huì)導(dǎo)致酶變性失活,溫度過低則會(huì)降低酶的催化效率,均會(huì)影響酶活性的測(cè)定結(jié)果。同時(shí),過氧化氫溶液需現(xiàn)配現(xiàn)用,過氧化氫易分解,放置時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致濃度降低,影響反應(yīng)的初始速率。分光光度計(jì)需提前預(yù)熱30分鐘以上,確保儀器處于穩(wěn)定的工作狀態(tài),避免因儀器不穩(wěn)定導(dǎo)致吸光度測(cè)量波動(dòng),影響酶活性計(jì)算的準(zhǔn)確性。北京單光束分光光度計(jì)使用壽命環(huán)保檢測(cè)中,分光光度計(jì)可檢測(cè)廢水的化學(xué)需氧量。

分光光度計(jì)在石油產(chǎn)品分析中的應(yīng)用,主要用于檢測(cè)油品的純度、雜質(zhì)含量與化學(xué)組成,為石油加工與質(zhì)量管控提供依據(jù)。在汽油純度檢測(cè)中,汽油中的芳香烴在254nm波長(zhǎng)處有特征吸收,而烷烴、烯烴吸收較弱,可通過分光光度計(jì)測(cè)量汽油在254nm處的吸光度,與標(biāo)準(zhǔn)純度汽油的吸光度對(duì)比,判斷汽油是否摻入低純度組分(如石腦油),芳香烴含量過高會(huì)導(dǎo)致汽油使用不充分,產(chǎn)生積碳,因此需將吸光度把控在特定范圍(如,具體取決于汽油標(biāo)號(hào))。在柴油中硫含量的檢測(cè)中,采用紫外熒光分光光度法,柴油樣品經(jīng)高溫使硫轉(zhuǎn)化為二氧化硫,二氧化硫在紫外光激發(fā)下產(chǎn)生熒光,熒光強(qiáng)度與硫含量成正比,在發(fā)射波長(zhǎng)330nm處測(cè)量熒光強(qiáng)度,檢測(cè)下限可達(dá),滿足國(guó)六排放標(biāo)準(zhǔn)中柴油硫含量≤的要求。在潤(rùn)滑油老化程度評(píng)價(jià)中,潤(rùn)滑油在使用過程中會(huì)氧化生成醛、酮等極性物質(zhì),這些物質(zhì)在270nm處有吸收,通過分光光度計(jì)測(cè)量潤(rùn)滑油在270nm處的吸光度變化,吸光度越高表明老化程度越嚴(yán)重,當(dāng)吸光度超過時(shí),需更換潤(rùn)滑油,避免設(shè)備磨損加劇。此外,分光光度計(jì)還可用于石油產(chǎn)品中金屬添加劑(如抗磨劑中的鋅、清凈劑中的鈣)的檢測(cè),通過灰化、酸溶等前處理將金屬元素轉(zhuǎn)化為離子態(tài),再與顯色劑。
分光光度計(jì)在環(huán)境監(jiān)測(cè)的大氣顆粒物中重金屬(如鉛、鎘)檢測(cè)中應(yīng)用重要,是評(píng)估大氣污染對(duì)人體安全問題的關(guān)鍵手段。以大氣中鉛的檢測(cè)為例,采用微波消解-雙硫腙分光光度法,流程如下:將采集的石英濾膜剪碎,放入微波消解罐,加入硝酸-過氧化氫混合液,在微波消解儀中于180℃、1000W條件下消解30分鐘,冷卻后定容至25mL;取部分消解液,調(diào)節(jié)pH至,加入雙硫腙-四氯化碳溶液振蕩萃取,Pb2?與雙硫腙形成紅色絡(luò)合物,該絡(luò)合物在510nm波長(zhǎng)處有較大吸收峰。通過分光光度計(jì)測(cè)量吸光度,結(jié)合鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線可計(jì)算出中鉛的含量(單位:μg/m3)。檢測(cè)過程中需注意,石英濾膜需提前在500℃馬弗爐中灼燒2小時(shí),去除有機(jī)雜質(zhì);微波消解參數(shù)需嚴(yán)格把控,升溫速率過快會(huì)導(dǎo)致消解罐壓力驟升,存在安全問題;雙硫腙溶液需避光保存,且每批次需重新配制,防止因氧化失效導(dǎo)致顯色不完全。分光光度計(jì)需定期用鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液驗(yàn)證線性范圍(μg/mL),確保檢測(cè)下限滿足大氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(GB3095-2012)中鉛的年平均濃度限值(μg/m3)要求。 分光光度計(jì)可快速判斷樣品中是否含有目標(biāo)物質(zhì)。

分光光度計(jì)在質(zhì)量檢測(cè)中的含量測(cè)定環(huán)節(jié)應(yīng)用頻繁,以維生素B??注射液的含量測(cè)定為例,維生素B??在361nm和550nm波長(zhǎng)處有特征吸收峰,根據(jù)相關(guān)典籍規(guī)定,需采用紫外-可見分光光度法進(jìn)行含量測(cè)定。具體操作步驟為:精密量取維生素B??注射液適量,用磷酸鹽緩沖液(pH=)稀釋至適宜濃度,在361nm波長(zhǎng)處測(cè)量吸光度,同時(shí)配制維生素B??標(biāo)準(zhǔn)品溶液,在相同條件下測(cè)量吸光度,根據(jù)公式計(jì)算注射液中維生素B??的含量,含量(%)=(A樣×C標(biāo)×D)/(A標(biāo)×C樣理論)×100%,其中A樣為樣品吸光度,A標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)品吸光度,C標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)品濃度,D為樣品稀釋倍數(shù),C樣理論為樣品理論濃度。在操作過程中,磷酸鹽緩沖液的pH值需嚴(yán)格把控在±,pH值的變化會(huì)影響維生素B??的吸收光譜,導(dǎo)致吸光度測(cè)量偏差。同時(shí),樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋過程需使用移液管和容量瓶進(jìn)行精密操作,確保稀釋倍數(shù)準(zhǔn)確,若稀釋倍數(shù)出現(xiàn)誤差,會(huì)直接影響含量計(jì)算結(jié)果。分光光度計(jì)需在檢測(cè)前進(jìn)行波長(zhǎng)校準(zhǔn),使用鈥玻璃標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在361nm和550nm波長(zhǎng)處進(jìn)行校驗(yàn),確保波長(zhǎng)偏差不超過±。此外,維生素B??溶液對(duì)光敏感,在配制和測(cè)量過程中需避免強(qiáng)光照射,配制好的溶液需在2小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)。 分光光度計(jì)運(yùn)行時(shí),不可隨意打開樣品室,避免干擾。北京單光束分光光度計(jì)使用壽命
不同型號(hào)的分光光度計(jì)在測(cè)量范圍和精度上有差異。北京單光束分光光度計(jì)使用壽命
分光光度計(jì)在催化劑性能評(píng)價(jià)中的應(yīng)用主要通過監(jiān)測(cè)反應(yīng)體系吸光度變化,實(shí)現(xiàn)催化活性與選擇性的加快分析。在光催化劑性能評(píng)價(jià)中,如二氧化鈦(TiO?)光催化降解甲基橙實(shí)驗(yàn),甲基橙在464nm波長(zhǎng)處有強(qiáng)吸收,吸光度與濃度呈線性關(guān)系(符合朗伯-比爾定律)。實(shí)驗(yàn)時(shí)將TiO?光催化劑加入甲基橙溶液中,在黑暗條件下攪拌30分鐘達(dá)到吸附-解吸平衡,隨后用紫外燈(波長(zhǎng)254nm)照射,每隔10分鐘取樣一次,離心分離催化劑后用分光光度計(jì)測(cè)量上清液在464nm處的吸光度,根據(jù)吸光度變化計(jì)算甲基橙的降解率(降解率=(A?-A?)/A?×100%,A?為初始吸光度,A?為t時(shí)刻吸光度),降解率越高、降解速率越快,表明光催化劑活性越強(qiáng)。在酶催化劑活性評(píng)價(jià)中,如脂肪酶催化油脂水解反應(yīng),油脂水解生成脂肪酸,可通過加入酚酞指示劑,用NaOH溶液滴定脂肪酸,同時(shí)用分光光度計(jì)在550nm處監(jiān)測(cè)溶液顏色變化(酚酞遇堿變紅,吸光度隨NaOH加入量增加而上升),根據(jù)吸光度變化曲線確定滴定終點(diǎn),計(jì)算單位時(shí)間內(nèi)脂肪酸的生成量,即酶活性(單位:U/mL,定義為每分鐘催化生成1μmol脂肪酸所需的酶量)。此外,分光光度計(jì)還可用于評(píng)價(jià)催化劑的選擇性,如在CO氧化反應(yīng)中,通過檢測(cè)反應(yīng)前后CO。 北京單光束分光光度計(jì)使用壽命