高校高靈敏多色熒光成像細胞計數儀有哪些

來源: 發(fā)布時間:2025-12-09

關注儀器性能準確性:可查看廠家提供的性能指標,或參考用戶評價,還可通過與手工計數結果對比,或借助標準品驗證。也可要求廠家提供復雜樣本的計數演示,觀察其對細胞的識別是否準確。重復性:了解儀器的變異系數(CV)值,一般要求 CV<5%,CV 值越小,重復性越好。速度:關注單樣本計數時間和整體檢測通量,選擇計數速度快、能在短時間內處理多個樣本的儀器,以提高實驗效率。計數范圍:若實驗中細胞濃度波動大,需選擇計數范圍寬的儀器,確保在不同濃度下都能準確計數??捎糜跈z測食品和飲料中的微生物數量,如細菌、酵母菌和霉菌等。高校高靈敏多色熒光成像細胞計數儀有哪些

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自動細胞計數儀的使用方法1. 實驗前準備儀器檢查:開機預熱(部分儀器需 10-15 分鐘),檢查鏡頭是否清潔,軟件是否正常啟動。試劑與耗材:準備臺盼藍染液(0.4%,過濾除菌)、無菌 PBS 或培養(yǎng)基(用于稀釋細胞)、計數板(一次性或可重復使用,重復使用需用 75% 酒精清潔并晾干)。細胞懸液制備:將培養(yǎng)的細胞消化、吹打均勻,避免細胞成團(若有團塊,需過篩或重新吹打)。2. 樣本處理與上樣稀釋細胞:若細胞濃度過高(超過儀器計數范圍,通常 1×10?-1×10?個 /mL),用培養(yǎng)基或 PBS 稀釋至合適濃度(例如,取 100μL 細胞懸液 + 100μL 稀釋液,稀釋倍數為 2)。染色:按 1:1 比例混合細胞懸液與臺盼藍染液(如 50μL 細胞懸液 + 50μL 臺盼藍),輕輕混勻,室溫靜置 30 秒 - 1 分鐘(避免染色過久影響細胞活性)。上樣:用移液器取 10-20μL 混合液,緩慢滴加到計數板的進樣口,使液體自然充滿計數池(勿溢出),放置 1-2 分鐘讓細胞沉降??蒲袩晒饧毎嫈祪x廠家?guī)椭t(yī)生了解腫瘤細胞的數量、活力等情況,疾病的分期、治療方案制定提供依據。

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驗證儀器在不同濃度范圍內的計數準確性,確認其是否符合說明書標注的線性范圍(如 1×10?-1×10?個 /mL)。操作步驟:制備一份高濃度細胞懸液(如 2×10?個 /mL),用稀釋液按1:2、1:4、1:8、1:16等比例梯度稀釋。用自動計數儀對每個稀釋度計數,記錄實測濃度。以 “理論濃度”(稀釋前濃度 × 稀釋倍數)為橫坐標,“實測濃度” 為縱坐標,繪制散點圖并計算相關系數(R2)。若 R2>0.98,說明儀器在該范圍內線性良好;若低濃度(如 <1×10?個 /mL)或高濃度(如> 1×10?個 /mL)時偏離線性,需避免在該范圍使用,或通過濃縮 / 稀釋調整濃度。

高通量樣本加載儀器通過多通道微流控芯片(如6孔、8孔、96孔板適配)或自動化進樣系統(tǒng),同時加載多個樣本(如一次處理6-384個樣本),每個樣本分配到**的微通道或反應池,避免交叉污染。光學系統(tǒng)掃描光源:采用LED或激光作為光源,提供明場(白光)或熒光激發(fā)光(特定波長,如488nm激發(fā)AO,535nm激發(fā)PI)。物鏡與相機:配備高分辨率顯微物鏡(通常20-40倍)和高速CCD/CMOS相機,對每個樣本的多個視野(如每個樣本掃描10-30個視野)進行快速成像,確保覆蓋足夠多的細胞,減少統(tǒng)計誤差。自動化移動平臺:載物臺通過精密電機控制,實現X/Y軸自動移動,快速切換不同樣本和視野,完成全樣本掃描(整個過程通常在1-5分鐘內完成)。腫瘤細胞研究:分析化療后細胞形態(tài)變化(如凋亡細胞皺縮、壞死細胞腫脹)。

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細胞計數儀是生物學研究、醫(yī)學檢測及生物制藥等領域中用于快速、準確計數細胞數量和分析細胞活性的儀器。它能替代傳統(tǒng)的血細胞計數板(手動計數),顯著提高計數效率和準確性,減少人為誤差。自動細胞計數儀的工作原理(以常用光學成像型為例)樣本制備:將細胞懸液與臺盼藍染液按比例混合(臺盼藍可穿透死細胞細胞膜使其著色,活細胞不著色)。上樣:將混合液滴加到計數板的計數池中,確保無氣泡,細胞均勻分布。成像與識別:儀器通過光學鏡頭拍攝計數池內的細胞圖像,內置算法自動識別:活細胞(透明、形態(tài)完整)和死細胞(藍色、形態(tài)可能破損)。排除雜質、細胞團(通過大小和形態(tài)篩選)。數據計算:自動統(tǒng)計細胞總數、活細胞數、死細胞數,并計算活細胞率(活細胞數 / 總細胞數 ×100%)、細胞濃度(個 /μL 或個 /mL)等參數。全自動血細胞計數儀是常用設備,可對血液中的紅細胞、白細胞和血小板進行快速準確的計數和分類。熒光細胞計數儀代理商

全自動細胞計數儀在疾病診斷中,可對穿刺活檢等樣本中的細胞進行計數和分析。高校高靈敏多色熒光成像細胞計數儀有哪些

選擇適合的高通量細胞計數儀,需綜合考慮實驗需求、儀器性能、易用性、維護成本及售后服務等方面。明確實驗需求細胞類型:不同細胞對計數儀要求有別。血液細胞、細菌等小型細胞,可選用基于電阻抗原理的計數儀;大型細胞、細胞團或形態(tài)復雜的原代細胞,光學細胞計數儀尤其是熒光款可能更合適。實驗目的:若只是常規(guī)細胞傳代、凍存等簡單計數,明場計數儀基本可滿足;若用于細胞***、基因編輯、生物制藥等,對細胞活性、周期等多參數分析有需求,則需選擇流式細胞計數儀或具備多參數分析功能的高通量細胞計數儀。實驗通量:根據樣本數量和實驗頻率選擇。若樣本量大、頻率高,應選自動化程度高、通道數量多的儀器,如一次能處理 96 個樣本的機型;若樣本量較小,可選擇通道數較少、較為小巧的設備。高校高靈敏多色熒光成像細胞計數儀有哪些