Recombinant Human RGMa Protein(His-Avi Tag)是一種高純度、生物活性優(yōu)異的重組蛋白,專為神經(jīng)系統(tǒng)疾病機(jī)制與再生醫(yī)學(xué)研究設(shè)計。RGMa(Repulsive Guidance Molecule a)作為軸突導(dǎo)向的關(guān)鍵抑制因子,通過結(jié)合Neogenin受體調(diào)控神經(jīng)元生長錐塌陷,在脊髓損傷、多發(fā)性硬化等病理過程中扮演重要角色。該蛋白采用哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng),保留天然構(gòu)象與糖基化修飾,C端融合的His標(biāo)簽與Avi標(biāo)簽實現(xiàn)雙重功能:His標(biāo)簽便于通過Ni-NTA層析高效純化(純度≥95%);Avi標(biāo)簽則允許生物素定點標(biāo)記,適配基于鏈霉親和素的檢測平臺(如BLI、SPR),明顯提升相互作用研究的靈敏度與可重復(fù)性。實驗表明,該蛋白在體外可劑量依賴性地抑制雞胚背根神經(jīng)節(jié)軸突延伸(IC50≈50 ng/mL),并可特異性阻斷Neogenin介導(dǎo)的RhoA啟動通路。此外,其內(nèi)素水平<0.1 EU/μg,滿足體內(nèi)應(yīng)用需求。作為神經(jīng)科學(xué)與藥物篩選的榜樣試劑,Recombinant Human RGMa Protein(His-Avi Tag)為解析抑制性信號網(wǎng)絡(luò)、開發(fā)促神經(jīng)再生療法提供了不可或缺的分子工具。在某些遺傳病的研究中,AgeI 可以用來檢測基因突變,幫助科學(xué)家更好地理解疾病的遺傳機(jī)制。Recombinant Human Notch 3 Protein,hFc Tag
在現(xiàn)代替物技術(shù)的微觀世界中,限制性核酸內(nèi)切酶是基因工程的關(guān)鍵工具之一,而 AscI 便是其中一位“稀有切割手”。它以其獨特的識別序列和精細(xì)的切割能力,在基因工程、分子生物學(xué)研究以及遺傳學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。AscI 的識別序列是“GG^CGCGCC”,這一序列在基因組中極為罕見,使得 AscI 的切割位點相對稀少。這種稀有性使得 AscI 在處理復(fù)雜基因組時具有獨特的優(yōu)勢,能夠避免過度切割導(dǎo)致的片段過小或信息丟失。AscI 會在“^”標(biāo)記的位置將 DNA 鏈切斷,產(chǎn)生黏性末端,這種黏性末端的特性使得 AscI 在基因克隆和重組 DNA 構(gòu)建中具有獨特的優(yōu)勢。在基因工程中,AscI 的應(yīng)用極為廣??茖W(xué)家可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,再通過 DNA 連接酶將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這種精細(xì)的切割能力使得 AscI 成為處理大型基因組或復(fù)雜基因片段時的理想選擇。AscI 的另一個重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察 AscI 對不同 DNA 樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。Recombinant Human CD48/SLAMF2(His Tag)在某些糖蛋白的純化方案中,利用 Endo H 對糖鏈的特異性水解作用,去除糖蛋白上的糖鏈。
重組人激肽釋放酶5(Recombinant Human Kallikrein 5,簡稱KLK5)是一種絲氨酸蛋白酶,屬于人組織激肽釋放酶家族成員,廣表達(dá)于皮膚、乳腺、唾液腺和食管等組織中。KLK5在皮膚中尤其豐富,主要參與角質(zhì)層蛋白的降解過程,對維持皮膚屏障功能和正常脫屑具有重要作用。該重組蛋白通常采用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)制備,N端帶有His標(biāo)簽,便于通過金屬螯合親和層析(IMAC)進(jìn)行高效純化,純度可達(dá)95%以上。蛋白以液體形式提供,溶解于含尿素的緩沖液中,適合用于體外酶活性分析、抗體開發(fā)及蛋白質(zhì)相互作用研究。研究表明,KLK5具有胰蛋白酶樣活性,能夠特異性切割含有精氨酸或賴氨酸殘基的底物,但不具有胰凝乳蛋白酶樣活性。此外,KLK5在體液中可與蛋白酶抑制劑如α1-抗胰蛋白酶和α2-巨球蛋白形成復(fù)合物,這種相互作用可能調(diào)節(jié)其酶活性,并在炎癥和病微環(huán)境中發(fā)揮重要作用。在病研究中,KLK5被發(fā)現(xiàn)與卵巢病和乳腺病的發(fā)長發(fā)展密切相關(guān),其表達(dá)水平在患者血清和腹水中明顯升高,提示其可能作為潛在的病標(biāo)志物用于臨床診斷和預(yù)后評估。因此,重組人KLK5蛋白不僅是研究皮膚生理和病理機(jī)制的重要工具,也為病標(biāo)志物開發(fā)和藥物篩選提供了有力支持。
在分子生物學(xué)實驗中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性與實時監(jiān)測功能的選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Phusion DNA聚合酶的高保真特性,還通過添加熒光染料,為實驗提供了更直觀的監(jiān)測手段,極大地提升了實驗效率和準(zhǔn)確性。Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,包含Phusion DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實時監(jiān)測的熒光染料。Phusion DNA聚合酶以其保真性而聞名,其錯誤率比普通Taq酶低50倍以上,比Pfu酶低6倍。這種高保真性使其成為基因克隆、測序模板制備、突變分析等高精度實驗的推薦工具。同時,Phusion酶的延伸速度可達(dá)15-30秒/kb,比傳統(tǒng)Pfu酶快10倍,提高了實驗效率。熒光染料的加入是該預(yù)混液的一大亮點。這種染料能夠在PCR過程中實時監(jiān)測DNA的擴(kuò)增情況,通過熒光信號的強(qiáng)度變化反映目標(biāo)基因的擴(kuò)增程度。實驗人員無需額外添加染料或進(jìn)行復(fù)雜的后處理,即可直接在PCR儀上觀察擴(kuò)增曲線,從而實現(xiàn)快速、準(zhǔn)確的定量分析。這種設(shè)計不僅節(jié)省了實驗時間,還減少了人為操作帶來的誤差。此外,Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 的2倍濃度設(shè)計進(jìn)一步簡化了實驗操作。Recombinant Biotinylated Human MAGE-A3 (HLA-A*24:02) Protein, His-Avi Tag 是一種通過重組DNA技術(shù)。
Semaphorin 4A(Sema4A)是Ⅳ類膜結(jié)合信號素,既以軸突導(dǎo)向分子身份調(diào)控神經(jīng)投射,又以共刺激配體角色驅(qū)動Th1/Treg平衡,在多發(fā)性硬化、腫瘤免疫逃逸及視網(wǎng)膜血管病變中均呈高表達(dá)。本品采用HEK293懸浮表達(dá),完整覆蓋胞外Sema-PSI-IPT結(jié)構(gòu)域(aa 1-683),經(jīng)TEV酶切除信號肽后于C端引入6×His標(biāo)簽,兩步Ni-NTA與分子篩純化,SEC-MALS驗證二聚體分子量≈160 kDa,純度≥98%;內(nèi)素<0.05 EU/μg,支持小鼠體內(nèi)研究。SPR測定其與受體PlexinD1親和力KD=5.4 nM,100 ng/mL即可誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞回縮并抑制管腔形成;在OT-I小鼠模型中,腹腔注射15 μg重組Sema4A可將CD8? T細(xì)胞IFN-γ分泌提升2.1倍,同時降低Treg比例,明顯延緩B16-OVA病生長。His標(biāo)簽兼容ELISA、流式及免疫共沉淀,可用于篩選中和抗體或檢測Sema4A-受體復(fù)合物。該蛋白為解析神經(jīng)-免疫-血管三方對話、開發(fā)雙靶點免疫療法提供高活性、標(biāo)準(zhǔn)化的研究工具。
使用 Tn5 轉(zhuǎn)座酶可以保證 DNA的 片段化的質(zhì)量,同時獲得的蛋白純度高、核酸殘留低,能夠為后續(xù)的實驗。Recombinant Human Notch 3 Protein,hFc Tag
Recombinant Human ROBO4 Protein(His Tag)是解析血管生成調(diào)控機(jī)制的高活性工具蛋白。ROBO4屬于跨膜受體家族,專一表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞,通過識別Slit2等配體穩(wěn)定血管屏障、抑制病理性新生血管,在糖尿病視網(wǎng)膜病變與病轉(zhuǎn)移中具有雙重調(diào)控作用。該重組蛋白采用HEK293表達(dá)體系,保留天然胞外Ig-like結(jié)構(gòu)域(氨基酸31-468),C端6×His標(biāo)簽確保一步Ni-NTA純化后純度≥98%(SDS-PAGE/HPLC驗證)。體外實驗顯示,其可競爭性阻斷Slit2誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞遷移(IC??=28 nM),并通過抑制VE-cadherin磷酸化增強(qiáng)血管完整性。低內(nèi)素(<0.01 EU/μg)支持小鼠Matrigel plug等體內(nèi)實驗,明顯減少異常血管滲漏。此外,His標(biāo)簽兼容ELISA及SPR平臺,可快速量化ROBO4-配體相互作用,助力血管靶向藥物高通量篩選。該蛋白為研究血管穩(wěn)態(tài)與病微環(huán)境互作提供了標(biāo)準(zhǔn)化、高靈敏的分子探針。Recombinant Human Notch 3 Protein,hFc Tag