在生物技術(shù)的微觀世界里,限制性核酸內(nèi)切酶是基因工程中不可或缺的工具,而AflII便是其中一位“精細(xì)剪刀手”。它是一種能夠特異性識(shí)別并切割DNA的酶,憑借其高度的特異性和精細(xì)的切割能力,在現(xiàn)代替物技術(shù)中發(fā)揮著重要作用。AflII的識(shí)別序列是“C^TTAAG”,這意味著它會(huì)在DNA雙鏈上尋找這一特定序列,并在“^”標(biāo)記的位置將DNA鏈切斷。這種切割方式會(huì)產(chǎn)生黏性末端,即切割后的DNA片段兩端會(huì)暴露出一段互補(bǔ)的單鏈區(qū)域。這種特性使得AflII在基因克隆和重組DNA構(gòu)建中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。在基因工程中,AflII的應(yīng)用極為廣??茖W(xué)家們可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來(lái),就像從一幅巨大的拼圖中精確地取出需要的那一塊。隨后,通過(guò)DNA連接酶,將切割后的基因片段與載體DNA連接起來(lái),構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這一過(guò)程不僅需要精細(xì)的切割,還需要切割后的片段能夠完美匹配,而AflII的黏性末端特性正好滿(mǎn)足了這一需求。AflII的另一個(gè)重要應(yīng)用是基因分析。通過(guò)觀察AflII對(duì)不同DNA樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。
重組人Kremen-2蛋白(Recombinant Human Kremen-2 Protein, His Tag)是一種重要的細(xì)胞表面受體,屬于Kremen家族,主要參與調(diào)控Wnt/β-catenin信號(hào)通路。Kremen-2蛋白通過(guò)與Dickkopf(DKK)蛋白協(xié)同作用,抑制Wnt信號(hào)通路的啟動(dòng),從而在胚胎發(fā)育、細(xì)胞增殖、組織穩(wěn)態(tài)及病發(fā)生等過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。該重組蛋白采用真核表達(dá)系統(tǒng)(如HEK293細(xì)胞)制備,確保了其天然構(gòu)象和生物活性。其N(xiāo)端融合了His標(biāo)簽,便于通過(guò)Ni-NTA親和層析進(jìn)行高效純化,獲得高純度、高穩(wěn)定性的蛋白產(chǎn)物。這種設(shè)計(jì)不僅提高了蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,也方便了后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作,如ELISA、Western blot、免疫沉淀及蛋白相互作用研究等。研究表明,Kremen-2在多種病中表達(dá)異常,與腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。此外,Kremen-2還參與調(diào)控骨代謝和神經(jīng)發(fā)育等生理過(guò)程。因此,重組人Kremen-2蛋白不僅是研究Wnt信號(hào)通路的重要工具,也為開(kāi)發(fā)相關(guān)疾病的治藥物提供了有力支持,具有重要的科研和臨床應(yīng)用價(jià)值。Recombinant Biotinylated Human BDCA-2 Protein,His-Avi TagPhusion Master Mix的成分是Phusion DNA聚合酶,這是一種具有高保真性的熱穩(wěn)定酶它能夠以準(zhǔn)確性復(fù)制DNA模板。
重組人Latexin蛋白(Recombinant Human Latexin Protein, His Tag)是一種天然存在于哺乳動(dòng)物組織中的羧肽酶抑制劑,主要在神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)和某些外周組織中表達(dá)。Latexin是目前已知的只有一種能夠特異性抑制羧肽酶A(CPA)和羧肽酶B(CPB)活性的內(nèi)源性蛋白,在調(diào)控蛋白質(zhì)降解、細(xì)胞分化及炎癥反應(yīng)等過(guò)程中發(fā)揮重要作用。該重組蛋白通常采用大腸桿菌或真核表達(dá)系統(tǒng)(如HEK293細(xì)胞)制備,N端帶有His標(biāo)簽,便于通過(guò)Ni-NTA親和層析進(jìn)行高效純化,獲得高純度、高穩(wěn)定性的蛋白產(chǎn)物。His標(biāo)簽的引入不僅提高了蛋白的溶解性,也便于后續(xù)的Western blot、ELISA、酶活性抑制實(shí)驗(yàn)及蛋白相互作用研究。研究表明,Latexin在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、干細(xì)胞維持及病抑制中具有潛在功能。例如,在神經(jīng)干細(xì)胞中,Latexin可能通過(guò)調(diào)控蛋白酶活性影響細(xì)胞命運(yùn)決定;在某些病中,其表達(dá)水平與病進(jìn)展呈負(fù)相關(guān),提示其可能具有抑病作用。因此,重組人Latexin蛋白不僅是研究蛋白酶調(diào)控機(jī)制的重要工具,也為開(kāi)發(fā)相關(guān)疾病的治策略提供了有力支持,具有廣的科研和臨床應(yīng)用前景。
SETD7(SET domain containing 7)是依賴(lài)S-腺苷甲硫氨酸的組蛋白H3K4特異性甲基轉(zhuǎn)移酶,亦催化p53、TAF10等非組蛋白底物,在干細(xì)胞維持、代謝重編程及病抑制網(wǎng)絡(luò)中扮演“表觀開(kāi)關(guān)”角色。本品以昆蟲(chóng)細(xì)胞-桿狀病毒系統(tǒng)表達(dá)全長(zhǎng)催化域(aa 1-366),保留天然折疊與輔因子結(jié)合口袋;N端6×His標(biāo)簽經(jīng)Ni2?-NTA、離子交換兩步純化,SDS-PAGE與SEC-MALS顯示單體均一,純度≥98%;內(nèi)素<0.05 EU/μg,適配體外酶活、晶體學(xué)與細(xì)胞轉(zhuǎn)染。功能驗(yàn)證:在標(biāo)準(zhǔn)甲基化體系中,100 nM SETD7可在30 min內(nèi)將H3(1-21)肽段K4位單甲基化提升至85%,Km(SAM)=0.9 μM;ITC測(cè)定其輔因子結(jié)合熱力學(xué)ΔH=-8.6 kcal/mol,結(jié)構(gòu)模型與PDB 1O9S重疊RMSD<0.5 ?。His標(biāo)簽兼容SPR、AlphaLISA及Pull-down,可高通量篩選SAM競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑或底物模擬肽,加速糖尿病、病表觀治先導(dǎo)化合物的發(fā)現(xiàn)。該重組蛋白為解析SETD7底物譜、開(kāi)發(fā)位點(diǎn)特異性甲基化調(diào)控策略提供了高活性、可規(guī)?;难芯考?jí)試劑。Exp Taq DNA Polymerase 是一種經(jīng)過(guò)優(yōu)化的Taq酶,具有部分3'→5'校正活性,能夠擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)24 kb的復(fù)雜DNA片段。
重組人ITCH蛋白是一種重要的E3泛素連接酶,屬于HECT(Homologous to E6AP C-Terminus)家族,在蛋白質(zhì)降解、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和免疫調(diào)節(jié)等多種細(xì)胞過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。ITCH蛋白通過(guò)催化底物蛋白的泛素化,調(diào)控其降解或功能改變,從而參與細(xì)胞周期、炎癥反應(yīng)和應(yīng)激響應(yīng)等生物學(xué)過(guò)程。該重組蛋白通常采用真核表達(dá)系統(tǒng)(如昆蟲(chóng)細(xì)胞或哺乳動(dòng)物細(xì)胞)制備,以確保其正確的折疊和酶活性。ITCH蛋白具有典型的HECT結(jié)構(gòu)域,能夠特異性識(shí)別并結(jié)合底物蛋白,通過(guò)泛素-蛋白酶體途徑介導(dǎo)其降解。其重組表達(dá)形式為研究人員提供了高純度、高活性的蛋白工具,便于進(jìn)行體外泛素化實(shí)驗(yàn)、蛋白相互作用研究及藥物篩選等應(yīng)用。ITCH在免疫調(diào)節(jié)中尤為重要,能夠調(diào)控T細(xì)胞活化、細(xì)胞因子信號(hào)及NF-κB通路。其功能異常與多種疾病相關(guān),包括自身免疫病、炎癥性疾病及某些病。因此,重組人ITCH蛋白不僅是研究泛素化機(jī)制和信號(hào)通路的重要工具,也為開(kāi)發(fā)相關(guān)疾病的治策略提供了有力支持。它是一種限制性核酸內(nèi)切酶,宛如一位精細(xì)的“裁縫”,專(zhuān)門(mén)在DNA分子上施展“剪裁”技藝。Recombinant Human Adiponectin/Acrp30 Protein,hFc Tag
研究表明,優(yōu)化后的Cas12a系統(tǒng)在多種細(xì)胞類(lèi)型中表現(xiàn)出良好的編輯效率。Recombinant Mouse C10/CCL6
在現(xiàn)代替物技術(shù)的舞臺(tái)上,限制性核酸內(nèi)切酶AccI是一位備受矚目的“明星”。它是一種能夠特異性識(shí)別并切割DNA的酶,憑借其精細(xì)的切割能力,在基因工程領(lǐng)域扮演著不可或缺的角色。AccI的識(shí)別序列是“GT^AC”,這意味著它會(huì)在DNA雙鏈上找到這一特定的核苷酸序列,并在“^”標(biāo)記的位置將DNA鏈切斷。這種切割方式非常獨(dú)特,它會(huì)產(chǎn)生黏性末端,即切割后的DNA片段兩端會(huì)暴露出一段互補(bǔ)的單鏈區(qū)域。這種黏性末端的特性使得AccI在基因克隆和重組DNA技術(shù)中大顯身手。在基因工程中,科學(xué)家們常常需要將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中分離出來(lái),并將其插入到合適的載體中。AccI可以像一把“精細(xì)刻刀”一樣,將目標(biāo)基因和載體DNA在特定位置切割,暴露出的黏性末端能夠通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式相互結(jié)合,再利用DNA連接酶將它們連接起來(lái),從而構(gòu)建出重組DNA分子。AccI的應(yīng)用不僅局限于基因克隆,它還在基因分析和診斷中發(fā)揮著重要作用。通過(guò)AccI對(duì)DNA的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,幫助診斷某些遺傳性疾病。此外,AccI還可以用于構(gòu)建基因文庫(kù),為研究基因功能和進(jìn)化提供了重要的工具。AccI的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用是分子生物學(xué)發(fā)展的重要里程碑。 Recombinant Mouse C10/CCL6